Постановка реакции Браше

Грануляционная ткань в капсулах туберкулом давала положительные реакции на кислые гликозаминогликаны. Окраска толуидиновым синим основного вещества была метахроматичной при низком значении рН среды (3-4), метахромазия устойчива к действию спирта. Сохранение окраски при низких значениях рН раствора красителя и устойчивость к спиртам свойственны сульфосодержащим веществам. Для дифференцирования соединений, входящих в группу кислых гликозаминогликаиов, нами применялись реакции метилирования и омыления. Метилирование срезов в течение 2 ч полностью подавляло окраску. Последующее омыление приводило к восстановлению лишь очень бледной окраски, совершенно несравнимой по интенсивности с первоначальной. Поскольку в процессе метилирования — омыления из реакции выводятся сульфатные группы, резкое подавление окраски после такой обработки срезов дает весьма убедительное дополнительное основание думать, что мукополисахариды грануляционной ткани представлены главным образом их сульфатированными формами, типа хондроитинсульфата С. Однако для уточнения этого мы обработали срезы муколитическими ферментами. Оказалось, что мукополисахариды обладают известной устойчивостью к деполимеризующему действию тестикулярной и бактериальной гиалуронидазы. Следовательно, по своим гистохимическим особенностям они должны быть отнесены к категории веществ хондроитинсерпой кислоты С. В незначительных количествах в грануляционной ткани выявлялись нейтральные мукопротеиды. В тех капсулах, где происходило склерозирование грануляционной ткани, хондроитинсульфат С выявлялся в незначительном количестве, преобладал хондроитинсульфат В, количество PAS-позитивных нейтральных мукопротеидов было повышенным. В капсулах туберкулом наряду с достаточно интенсивно окрашенными реактивом Хейла участками встречаются и такие, бледная окраска которых оказывается едва уловимой, и, наконец, в некоторых участках, располагающихся чаще всего во внутренних слоях, вообще не удавалось выявить Хейл-позитивных веществ.

Related posts