Фотометрическое исследование активности дегидрогеназ в печеночном трансплантате
Ферменты исследовали при увеличении 1250 раз, измерения проводили в монохроматическом свете при длине волны 540 нм. Длину волны для каждого фермента определяли путем составления дисперсионной кривой спектра поглощения по специальной программе — сканирования. Толщина зонда была постоянно 1 мкм. Вычисления проводили по усредненному показателю экстинцин (Е)-логарифмированной величине пропускания света.
Полученные цифровые данные обрабатывали на ЭВМ «Wang 720С», скомпонованной с микроскопом-фотометром.
Уже в период хирургических манипуляций по выделению сосудов у донора из-за сдавления магистральных сосудов печени Развивается циркуляторная гипоксия и активность остальных ферментов по показателям средней экстинции продуктов ферментно-химической реакции значительно изменяется. Так показатели средней экстинции денситометрированной ЛДГ — азы возрастают, а активность СДГ — азы падает.
Одновременно в гепатоцитах печени происходит снижение активности Г6ФДГ.
Данную направленность гистоэнзиматической реакции гепатоцитов можно объяснить началом развития внутриклеточной гипоксии, что сочетается с бихимически выявляемым повышением концентрации молочной кислоты в крови животных.
Ярко выраженное нарастание активности лактатдегидрогеназы в ткани печени отмечается также и в период перфузии органа Холодовым раствором Хенкса, а активность СДГ продолжает снижаться.
В период повышения активности ЛГД-азы и снижения активности СДГ-азы основные энергетические потребности клетки компенсируются повышенной активностью ГбФ-дегидрогеназы, что сочетается со значительным уменьшением содержания внутриклеточного гликогена.